简介
激发滤光片是一种光学滤光片，用于阻挡或衰减某些波长的光，同时允许其他波长的光通过。通常使用在如显微镜、荧光成像、分光光度法等科学领域。只有使用正确的激发滤光片，真正所需的激发光才能到达实验观测的样品，从而提高对比度并降低背景噪声，得到最理想的结果。
使用时需要考虑的因素
1 荧光团的激发光谱
在选择激发滤光片时，必须考虑到荧光团的激发光谱。每个荧光团都有一定的波长范围，在这个波长范围内它能最有效地吸收光。通过将激发滤光片的透射范围与荧光团的激发光谱相匹配，可以最大限度地提高信噪比，获得理想的荧光强度。
2 发射滤光片兼容性
激发滤光片和发射滤光片的兼容性是成像的另一个关键因素。发射滤光片负责选择荧光团所需的发射波长，同时防止任何已经分散的激发光。为了避免光谱透光并保持良好的图像质量，确保激发和发射滤光片兼容是至关重要的。
3 光源特性
光源的特性也会影响激发滤光片。不同的光源发出特定波长或不同带宽的光，如汞灯、LED光源或激光二极管。你可以选择一个激发滤光片，通过了解你的光源的光谱输出来提高激发效率和减少背景噪声
4 光学设置和显微镜配置
理想的激发滤光片在很大程度上受光学设备和显微镜配置的影响。激发和发射路线会受到样品类型、物镜和显微镜设计的影响。
5 特殊需求
关于激发滤光片的选择，首先应从实际需要出发。例如，如果您处理的是活细胞或敏感样品，则可能必须尽量减少光毒性或光漂白。在这种情况下，使用传输效率好的窄带激发滤光片可能是有用的。
综上所诉：在选择激发滤光片时，参考上述因素。具体使用什么样的激发滤光片是一个没有普遍适用的解决方案的话题。最后，它将取决于你的特定实验是如何设置的，使用的荧光团，以及期望的结果。
常见问题锦集
- 我可以对多个荧光团使用宽谱激发滤光片吗? 对几个荧光团使用宽谱激发滤光片是可能的，但可能会存在光谱透光和信噪比降低的结果。建议使用与每个荧光团的独特激发光谱相对应的窄带激发滤光片以获得最佳实验结果。
- 激发滤光片只用于荧光显微镜吗? 激发滤光片在荧光显微镜中被广泛使用，是因为它们可以激发荧光团。但并不局限于显微镜，它们也可应用于包括荧光光谱，共聚焦显微镜和流式细胞仪等。
- 可以在不同的实验中重复使用激发滤光片吗? 只要荧光团的激发和发射特性保持不变，激发滤光片就可以在各种实验中反复使用。为了保证最好的结果，最好的做法是在每次新的实验前确认滤光片的适用性。
- 可以将发射滤光片作为激发滤光片使用吗? 发射滤光片，通常是用来排除不必要的激发光，只是传输已经产生的荧光。它们在传输必要的激发波长时是无效的，这时便不适合用作激发滤光片。特殊实验需要特殊考虑。
- 如何清洗激发滤光片? 无论个人或滤光片厂家在清洗激发滤光片的过程中都建议小心，以免对膜层和玻璃表面造成损伤。建议先用光学气球吹，看是都能及时清除表面的灰尘和碎屑，然后用无尘布轻轻擦拭过滤光片的表面来清楚脏污。为确保滤光片的性能和使用寿命，专业的清洗清洁，建议交给专业的滤光片厂家去完成。