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荧光滤光片Cubes解析

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立方体(俗称支架或cube)在荧光显微镜中起到至关重要的作用,它可以让隐藏其内里的荧光滤光片,在实验或工作研究时,以获得清晰的细胞和组织图像。无论您是专业人士还是初学者,了解它们都会丰富您的显微镜之旅,更好地探索看不见的世界!

什么是Cubes呢?

Cubes可以简单理解为:它是像一座小房子一样的立方体,其中包含滤光片、以固定的位置和角度来装配实验需要的激发滤光片,二向色镜和发射滤光片。

荧光滤光片的主要用途是选择性地透射特定波长的光,同时阻挡不需要的光。它通过使用三个关键元器件来实现:

激发滤光片:顾名思义,让激发荧光样品的光通过。

二向色镜:该镜将激发光反射到观测样品上,同时允许发射的荧光通过。

发射滤光片:用于阻挡任何剩余的激发光,只允许样品发出的荧光到达检测器。

宇隆提供市场上广泛需求的显微镜型号匹配的各种cubes:

Cubes是怎么工作的呢

以尼康cube为例,探究它的工作原理,可以揭开令人惊叹的荧光显微镜图像背后的神奇面纱。让我们一起来了解吧:

激发光的选择

依据样品光测的目的和实验需求选择对应的激发波长。

样本照明

定向激发光激发样本中的荧光分子,这些分子从中吸收能量,让自己变得“兴奋”。

过滤发射光

为了隔离阻挡发出的荧光灯,另一种滤光片起作用——发射滤光片。这个滤光片阻挡了剩余的激发光,而只允许发射光通过。把它想象成俱乐部的保镖,只允许特定的“客人“进入。

图像捕捉

最后是用相机或眼睛捕捉过滤后的效果(这取决于显微镜的设置)。您所看到的是样品清晰而充满活力的图像,去掉了不需要的背景激发光。

如何选材合适的Cubes?

选择合适的cubes和荧光滤光片是一个细致的过程,深入了解关键考虑因素可以帮助您做出明智的选择:

首先,了解您的显微镜型号和需要的荧光团

显微镜的兼容性。根据您的显微镜型号确定对应的Cubes,再根据不同的荧光染料和蛋白质特定波长范围去选择荧光滤光片(因为不同的荧光染料有其特定的激发和发射光谱)。合适的光谱匹配cubes能有效捕获荧光信号,同时最大限度地减少不必要的背景噪声。

多色成像

如果您的实验涉及多色成像,同时使用多个荧光团,必须考虑光谱重叠。选择可以容纳多个荧光团与最小的光谱干扰。这可以防止通道之间的泄漏和串扰,保持数据的完整性。

荧光强度

成像系统的灵敏度和荧光团的亮度会影响滤光片的选择。如果您正在处理弱荧光样品,请选择具有高传输效率的cubes和荧光滤光片,以最大化信噪比并有效捕获微弱信号。

正确的二向色镜

二向色镜起着非常关键的作用,所以选择正确的二向色镜就显得尤为重要。它反射激发光,同时允许发射的荧光通过。确保其光谱特性与您的荧光团和显微镜的设置一致,相互匹配以达到最优的观测效果。

样本的选择

样本的类型和厚度会影响过cubes和荧光滤光片的选择。太厚的样本或自动荧光样本可能需要具有优越光学特性和更好荧光滤光片,以最大限度地减少背景噪声并提高图像质量。